各位, 质粒转染进细胞后 wb验证后发现比空载 组目的蛋白调高了一倍,不知道这样的过表达 对于实验来说是不是有点低?请问下一般wb验证目的蛋白要相对于对照高多少才比较理想,因为本人要做芯片
可以的。通常有转染效率问题在里面。
转染很难达到100%,你的转染效率有多大?
要看你过表达后的指标来判断。 比如,此蛋白有无调控的基因,检测其下游蛋白的表达情况,mRNA表达情况什么的。
有人觉得过表达不要太高 这样和生理状态的高表达不一致,导致假阳性;但也有人因为过大不是太高 导致结果不是很明显,前者的话 你这样已经很好了,后者的话 你需要调整转染效率
看你自己的转染效率,你这个看起来还好吧。