2025-04-01 03:11:46

有没有方法可以促进靶蛋白入核?

做一个转录因子的研究。这个分子在胞浆里活化时入核发挥转录调控作用,我构建了过表达质粒。转录效率很好可以提高几百倍,但检测其下游的分子没有被活化。所以不确定这个分子有没有入核,这个可能到提核蛋白做wester 或免疫荧光。我的问题是有没有方法可以促进靶蛋白入核?多谢了!

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3个回答

促进靶蛋白入核不难,加个信号就行了。首先要弄清楚:

1.WB验证蛋白水平确实过表达了;

2.转录因子一般是跟启动子结合的,其调控下游分子是直接还是间接的调控的。

2025-04-01 03:34:12

 加NLS 序列

2025-04-01 03:37:01

一般转录因子自身有入核信号,促进其入核有些需要和co-activator结合,或者有上游刺激信号;这些需要参考已有研究文献。
同楼上同学,你的过表达几百倍是不是QPCR水平的数据,在WB水平有检测到目标蛋白高表达吗?你的研究目的是确认它是一个转录因子,还是研究它的功能调控。

2025-04-01 05:10:02

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