做MTT法,测细胞生长过程中外源性药物对细胞增殖的影响,结果在最后的阶段加入DMSO轻轻震荡15分钟后,96孔板底部的蓝紫色的甲瓒结晶根本没有溶解,我把DMSO溶解液吸入另一个96孔板中测吸光度的变化,发现加药组和空白组以及调零组基本上都没有什么差异,而且数值基本上都特别低,这是为什么呢?为什么我的DMSO就不能溶解甲瓒呢?有大神遇见过此类问题吗?
会不会MTT有问题?你的MTT溶液是什么颜色?配了有多久了?
你的DMSO没问题吧。DMSO可是号称万能溶剂的,溶解性是极强的。
换瓶新开的DMSO。怀疑原来的不纯了,吸水了。
1.MTT配出来是透明淡黄色的,配好过滤除菌、分装以后可以用锡箔纸包上冻在-20冰箱,放半年是没问题的;2.你要是有几组不同时间点的话最好还是分几个板子做吧,我们都是直接在原来的板子测光度;3.你到别的实验室借点DMSO试试,应该是DMSO加进去结晶很快就溶解了,我就放在脱色摇床上摇5分钟