以下是溶解曲线，其中峰的顶端貌似有点双峰，这是什么原因呢，请高手指教：
有双峰，说明引物的特异性不好。每个峰值代表一个扩增产物。建议优化引物
引物和扩增时的上游引物最好不要有交叉。。。如果有交叉的话，即使模板里不表达该miRNA，也会因为上游引物和RT引物的退火形成双链，被PCR扩增。可能因为你的上游引物正好和颈环的某些部位互补，或者和URP互补，形成二聚体。我的建议是：把10个还改成6-8个另外，查文献，是否有别的颈环可以试试或者，降低引物的浓度，提高退火温度，提高特异性
