Q1: 是否将这个基因通过质粒或者siRNA高表达或抑制，然后用Western和PCR检测这个通路关键蛋白和基因的表达的变化就足以验证？
A1: 个人觉得，初期的实验的话， 按这样思路做是对的。
Q2: 是否还需要补充其他方面的实验？
A2: 最好同时观察你的感兴趣基因如何通过你要研究的通路而引起细胞、动物发生变化（比如死亡，存活等）。按照你初期实验的结果， 找到这个通路中受该感兴趣基因调控的molecules. 然后，就可以继续向下发掘了。
好运

我做的不是信号通路，不过还是知道一点。基本思路是这样的，但是现在的文章要求比较全，能把故事说圆。首先，你先要明确做什么？细胞和动物能不能都做？如果不能就要在某一方面进一步拓展。此外，随着Chip等技术的运用，分子间有无之间的binding的关系？对细胞形态功能的影响？诸如磷酸化、糖基化等的影响？很多方面都值得考虑，也需要阅读文献。
建议先想想有无足够的条件做全一个小的实验，再进行后续延伸~