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2024-11-15 15:05:46

抗体可以用于检测总的磷酸化水平吗，还是只能用于检测akt1

本人预做AKT不同亚型对肿瘤作用的研究，可是有文献报道AKT1、2、3不同亚型磷酸化部位不同，现有p-akt473抗体，但所明书没说明与亚型的关系，有文献说473磷酸化部位为akt1，而akt3磷酸化为472，请问对否，是否我要研究akt3就要选对应的p-472呢，可我现有抗体可以用于检测总的磷酸化水平吗，还是只能用于检测akt1？
有些搞不懂，求指点！

信号转导

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2个回答

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Akt1、2、3的序列高度保守，尤其在这个磷酸化位点，p-akt473可以识别Akt总的磷酸化（akt1的473，akt2的474以及akt3的472），无法区分哪一个亚型。如果需要研究某一个亚型的磷酸化，一个可行的办法是通过采用可以识别Akt特异亚型的抗体进行免疫沉淀，然后再检测其磷酸化。

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2024-11-15 16:23:23

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如果你决心做，可以一试，过表达AKT1和AKT3，用你的磷酸化AKT3（s472）抗体检测一下，看特异性如何。用总AKT抗体（可用csg, #9272）作为参考。

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2024-11-15 16:29:56

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提问时间：	2024-11-15
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