最近我做的一些实验好像catenin和gsk3β在某一发育状态中表达都高,不理解啊,catenin的总蛋白明显高,gsk3β总蛋白高(肉眼能分辨出高),p-gsk3β-ser9低,应该表明gsk3β的活性高了,需要测酶活吗?
我之前做的就是这个,一般做GSK3β和βcatenin的时候要检测GSK3β、β-catenin和GSK3β(p-ser9)的表达变化的,我是用抗体进行检测的!其实涉及到wnt通路的时候主要是把研究目标放在β-catenin和GSK3β(p-ser9)之间的表达变化上的!
gsk3β总蛋白高,p-gsk3β-ser9低,应该表明gsk3β的活性高了。是GSK3β活性增高还是 降低?磷酸化水平降低,应该是活性降低吧。
你检测GSK3β的磷酸化形式了吗(p-ser9)?可以检测核内的b-catenin,未被泛素化的b-catenin最终入核。