2025-01-31 03:57:17

研究凋亡做WB,AIF一抗如何选择?

研究凋亡做WB,AIF一抗应该如何选择?我查了CST公司的,有的一抗是只针对67kD的IgG抗体,有的是含有抗67,,57kDl两个片段的抗体,有什么区别呢?研究凋亡通路的话,应该选择哪个抗体呢?
谢谢!!


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凋亡坏死与自噬×

2个回答

你说的应该是线粒体腔内的Apoptosis Inducing Factor吧,这个蛋白以前做过,个人认为:
1. AIF 前体分子量为67 KD,进入线粒体后被截短为分子量约为62 kD 的成熟分子,锚定于线粒体内膜,在某些凋亡诱导因素刺激下,AIF 在第101 和102 位氨基酸残基间发生切割水解,AIF继而从线粒体内膜脱落,形成分子量约为57 kD 的分子,再加上此时线粒体跨膜电位下降,线粒体外膜的通透性显著增加,AIF 通过线粒体外膜进入细胞质中,并进一步转位至细胞核,与DNA 发生结合;因此,如果想直接研究AIF有无核转位和诱导凋亡,个人觉得研究57KD的AIF分子就够了;但是如果还想研究一下正常情况下AIF在线粒体内的生理功能或别的未知的功能,则建议同时研究67KD的前体和57KD的成熟分子;

2. 我个人用过Santa Cruz的检测57kD的抗体,也用过CST的同时检测57kD和67KD的抗体,效果都很不错;而且这个蛋白分子量很普通,所以WB应该在技术上来说不是十分难的事情;


2025-01-31 06:33:22

做凋亡指标的话
当然是选大小片段都能检测的咯


2025-01-31 06:41:53

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