跑western blot 时 样品已经加上5x上样缓冲液并煮沸后,1.如果要稀释其浓度,还能稀释吗?2.是不是煮沸后 就不能稀释了?3.用什么稀释呢?纯水还是裂解液还是pbs等?谢谢各位大神!
1XSDS loading buffer稀释一下就好了
加入5X上样缓冲液并煮沸后,表明蛋白样品是1x的protein loading buffer浓度,稀释样品就用1x上样缓冲液就可以了。1x上样缓冲液可以用RIPA(或IP lysis buffer)稀释5x上样缓冲液配制。主要是考虑样品中甘油或蔗糖浓度一样就可以了。
煮沸之前加1X loading buffer
你是等质量等体积上样吗?在 蛋白质量一定情况下除了1Xloadingbuffer外,用rippa或者PBS补充实现等体积。