2024-10-15 09:44:21

AP-1的结合活性是不是只能用EMSA的方法测定?

请问各位ERK、SMAD是不是用免疫组化都可以测,AP-1的结合活性是不是只能用EMSA的方法测定;还有无其他简单易行的方法,请赐教。

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1个回答

可以用荧光素酶活性分析获得AP-1的相对活性。可以使用Reporter Assay System测定相对活性。转染后细胞用PBS洗涤两遍,加入100ul PLB(Passive lysis buffer),脱色摇床裂解30min,用细胞刮子将细胞轻轻刮下,收集细胞蛋白裂解液,12000 rpm离心15s,取10ul 上清样本加50ulLARII(luciferase Assay Reagent II),推入单光子检测仪(LUMI-SCINT,BIOSCAN,Co)测定10s荧光虫荧光酶相对活性即为AP-1相对活性

2024-10-15 12:51:07

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