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2025-01-08 01:19:26

如何检测MAPK的活性及表达方法？

在做测MAPK 活性的实验，用了液闪法和放射自显影，也做了P-ERK的WESTERN，用的底物是MBP,但是结果不一致，不知哪里出了问题，不知哪位高手能指点一二

生物化学
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4个回答

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P-ERK上ERK的活性形式，即ERK被磷酸化后才有活性。通常测定P-ERK来反映ERK的激活。如果将P-ERK与总ERK比较后可以进行半定量，因为在细胞中ERK是一直存在的。MAPK是一大类激酶途径的总称，至少包括七大类。不过，通常所说的MAPK是指ERK1/2。ERK和P-ERK是不能同时电泳分析的，需要分开进行。IP是指免疫沉淀。

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2025-01-08 05:37:49
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T-ERK1和T-ERK2应该可以同时测定，结果会出现两条带。

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2025-01-08 05:57:02
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p-ERK1和P-ERK2可以同时做，t-ERK1和T-ERK2也能一起做，但三种抗体是不能同时做的

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2025-01-08 07:04:52
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免疫组化法监测MAPK蛋白表达，可用逆转录聚合酶联反应RT-PCR，Western Blotting，原位杂交监测MAPKmRNADE表达，敬请指教。

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2025-01-08 07:09:46

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提问时间： 2025-01-08
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