20多KD的分子转膜到底用什么条件好啊？

最近在做分子VEGF的WB实验，选的分子量大小在27KD，刚开始用恒压100V，30min；60V，30min；后来又试恒流：250（300以及350）mA，30min；250mA，40min；250mA，60min，但是转膜一直没成功。有没有做过VEGF的盆友，20多KD的分子转膜到底用什么条件好啊？

蛋白质组学

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你用的0.22um的膜的话，转膜应该是没有问题的，因为我们做27KD的转膜条件250 50min，BCL-2,BAX做的较果都是特别好的，VEGF的抗体是否第一次用，有做出来过没有，还是你转膜后连内参都没有出来。如果内参都没有出来的话是否应该考虑样品的问题。

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2025-01-19 10:07:33

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转膜100v，30min之间短，蛋白没转上去了，60v30min，更短了，正确的时间应该是100v转膜60-70min，时间太长了会转过，不管你是什么蛋白叫什么名字，反正都是蛋白，你应该纠结的只是我的蛋白转膜不成功。不管你是多少KD或者蛋白是什么名字啊~20kd是哪个条件50kd，100kd还是那个条件，VEGF是哪个条件，EGF也是那个条件

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2025-01-19 10:46:55