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2025-04-15 13:55:05
反相色谱离子对-离子对试剂问题做的一个药物分析要用到9mM庚烷磺酸钠（磷酸调pH至2.8）：乙腈=77:23的流动相，用的菲罗门的填料为4μ米的C18柱子，现在出现两个问题： 一问题：主峰前面有7个杂质，每次检测都出现，有规律，保留时间也相同，走空白溶剂，是一条直线，可是主峰前面的杂质峰又纯化不去，于是又换了根C18柱，主峰前面的杂质峰果然小了很多，我把菲罗门的柱子过夜用0.5ml/min10%乙腈冲了3个小时，纯乙腈冲了1个小时，然后进样前两针主峰前面的杂质峰小了很多，但是第3针杂质又像以前一样出来了，我看到大家帖子上，都说离子对试剂很难平衡和冲洗，可是我平时半小时平衡的基线就很直了，难道是我平衡和冲洗的不够吗? 二问题：主峰后面还有1个小杂质，和主峰紫外扫描很相似，怎么调流动相柱温都分不开，还用过四氢呋喃，可是如果这个峰完全包含在主峰里，峰纯度都能达到，这样的杂质峰应该怎么分离呀？ ps：看到不少人说国产离子对试剂有问题，我用的是国药的沃凯的99%色谱纯离子对试剂，有人用过有问题吗？因为只有这一个试剂目前没法对比 |
4个回答
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反相离子对现在用的是比较多的，因为有关物质要求越来越严格，色谱条件相应的就要提高，离子对试剂在改善分离效果上还是很有作用的，使用离子对试剂选择液相条件主要是从色谱柱、离子对试剂种类、离子浓度、pH值、梯度斜率等方面进行，色谱柱的影响很大，这个只能在有限的条件下换柱子试，离子对试剂种类可以根据待分析物的特性来选择，离子浓度和pH要摸规律，梯度斜率一般是越小拉的越长，但是峰型会逐渐变宽。再有注意的一点是离子对试剂不要选国产的，支持国货在这方面还是别做的好，国产离子对试剂摸条件很大程度上是做无用功，让你不知道错误出在哪。 |
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苯基柱适合同样有苯环刚性结构的，通过pai键增加作用力提高分离。氨基碱性物质可用胺基柱氰基柱，通过氢键的作用提高分离效果。
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1. 基线平不代表柱子平衡好了。平衡不好离子对常见的问题是保留时间不稳定。 2.提高离子对浓度或微调pH，或者掺点甲醇看看。 |