2024-09-24 21:12:41

转录组测序原理及流程中,用polyT富集mRNA是什么意思?

转录组测序原理及流程中,用polyT富集mRNA是什么意思?另外,非编码RNA是在纯化前应该去除吗?用什么方法去除呢?

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生物信息学×

3个回答

转录组,主要想看基因表达。基因表达主要是mR N A,成熟m R N A尾巴有多聚A,所以用polyT来富集它。(还因为R N A中大部分是核糖体R N A,m R N A及lncRNA只是一小部分,所以要富集。)


2024-09-24 21:21:57

你的图是两个路线,两个实验要分开做的。第一个如上所述富集的是mRNA。第二个是获得去核糖体RNA,里面包含了mRNA、lncNRA、smallRNA、cir-RNA。如果仅看mRNA的变化,采用第一种路线富集mRNA,如果想得到更多的数据进行分析,选择第二种去核糖体RNA的做法。


2024-09-24 21:26:16

一般的RNA-seq指的是mRNA测序。由于真核生物的mRNA具有polyA尾巴,而用通用方法如trizol等提取出来的是全部的RNA,其中核糖体RNA占据绝大部分。因此需要对其进行纯化。真核生物一般采用polyT来富集沉淀(也称polyA富集)。原核生物的mRNA由于没有polyA尾巴,一般采用去核糖体试剂盒的方式。当然真核也可采用试剂盒方式去处核糖体RNA


2024-09-24 21:30:29

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