我的目标蛋白后面接了GFP,想用GFP抗体做免疫共沉淀,得到与目标蛋白相互作用的蛋白,以此寻找与目标蛋白相互作用的蛋白,不知这种做法的可行性如何?有做过的吗?用的是哪个公司的抗体。谢谢!
到是没有做过,GFP的抗体好象invitrogen有卖的。我觉得理论上到是可行的,但是得到的蛋白量因该不会太大,你为什么不直接纯化该蛋白呢。
可把你的蛋白挂在柱上,然后作用的蛋白溶液过柱,sds-page分析。
你的目的是用已知蛋白区吊未知蛋白对吧,这个出了CO-IP,GST pull-down也是可以实现的。你说的方法,就是免疫共沉淀的实验方法,理论上可行。
理论上可行,操作复杂