想用全细胞裂解液尝试 Native PAGE,然后转膜,用抗体检测特定蛋白的是否发生二聚化。问题1:我看到很多说法说细胞裂解液不能加热,那可以反复冻融吗?例如,刺激12h 后,当天是跑不成电泳的。问题2:转印 buffer 及转印时间,是否和 SDS-PAGE 的转印液一样,除了SDS和甲醇。问题3:看到很多帖子都说没有 Marker 适用于 Native PAGE,因为我要检测内源蛋白,是否就意味着我没有任何的阳性对照。抗体现出什么带,就认为是什么?
nvitrogen有Native Gel的marker,效果还不错。
没有预染的,你可以转膜以后用丽春红染,再标注就可以了。以前还没用预染marker的时候都是这么做的,挺简单的。
thermo有Native page的marker