仅仅是作为抗原的话，跑SDS-PAGE后切胶纯化就可以了啊，

可以尝试在透析外液中加入一定量的甘油、巯基乙醇等。

巯基乙醇是还原剂，促进二硫键，帮助复性；甘油是增加粘度，减少分子碰撞机会，也是帮助复性的。

基本上尿素不影响GST蛋白的纯化，只要你的洗脱液中也含有相同浓度的尿素就可以了。纯化后再考虑复性的问题，复性一般较难，如果不能复性用包涵体也可免疫母鸡。

另外，你的诱导表达温度太高了，建议用25度或20度，16度也可以一试的。

我做过GST纯化！从包涵体内纯化是有一定的难度！我个人认为：是因为蛋白以包涵体存在时，蛋白活性较低或者是很低！Glutathione Sepharose 4B 不易 吸附GST！我曾经作过比较：一种蛋白以分泌形式分泌到培养基，另外的同种蛋白以包涵体存在（即我的蛋白以以上两种形式存在）。两种蛋白同时以Glutathione Sepharose 4B 纯化。结果可溶性蛋白纯化效果要好的多！

另外，我提醒一点的是，不同蛋白性质不同。以上仅仅是我个人的观点和看法！具体的还要你自己哦！蛋白析出最大可能是你的蛋白浓度有些高！一般的1-3mg/ml.为宜。