PMSF是胆碱脂酶抑制剂,提取样品总蛋白时,为什么网上很多裂解液配方中都加有PMSF?胆碱脂酶主要分布于血浆、胰腺、唾液腺、神经组织等 书上没有提肝脏,做肝脏组织,裂解液中要加PMSF吗?
PMSF是蛋白酶抑制剂
PMSF即苯甲基磺酰氟,是蛋白酶抑制剂,可抑制多种蛋白酶活性,为防止蛋白降解,提高得率,一般都要加。但要注意PMSF毒性较大,会严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。一旦眼睛或皮肤接触了PMSF,应立即用大量水冲洗之。且其不易溶于水易溶于异丙醇。
在水液体溶液中不稳定,30分钟就会降解一半,必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF,样品处理超过1h,补加一次。(见水分解,使用前加入)