离心后在界面收集到的蛋白怎样浓缩呢？

请问离心后在界面收集到的蛋白怎样浓缩，还有大家一般用什么方法来收集界面处的蛋白啊？谢谢！

蛋白质组学

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透析袋浓缩

冷冻干燥

这2种比较常用吧

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2024-11-14 10:47:57

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我做线粒体提取的时候用过蔗糖密度梯度离心.当时是用注射器来吸取目的界面的,虽然会有一些损失,但是对上层界面的扰动比较小.因为是做线粒体的双向电泳,我当时把蛋白沉淀复溶除盐了,复溶时加裂解液少一些,也算起到浓缩作用了吧

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2024-11-14 12:34:00

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我的线粒体完整性是根据电镜结果判断的,是在我们学校电镜室完成的.纯度是做了western,检测了线粒体中是否含有胞浆蛋白.不过,我觉得一般电镜结果比较好的话就可以了吧.还有一些实验室有电动匀浆器,以及很规范的protocol,提取之后测量线粒体的呼吸控制比和磷氧比结果是很好的.

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2024-11-14 12:46:21

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加裂解液裂解就可以了.我做双向电泳,用的是含尿素和chaps的裂解液.之后冰浴超声.为了除盐,又做了沉淀复溶.

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2024-11-14 12:50:14

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