最近要跑BRCA2蛋白,390kda超大分子量。6%分离胶最大貌似也只能适合220kda左右的蛋白吧,求指教!感激不尽
个人觉得切胶的范围应该是浓缩胶与分离胶的交界线至蛋白marker指示的最大分子之间。
浓缩胶浓度低,分离胶浓度高于浓缩胶,一般不小于5%。楼主可以试试5%,或者梯度的凝胶的梯度一般是3%-30%,分离范围是10—200kd。我觉得应该可以。
我们实验室曾经跑过400KD的蛋白,用5%浓缩胶,8%分离胶也跑下来了。也可以尝试3%凝缩胶,6%分离胶,尽量往下跑点,溴酚蓝肯定是要完全跑掉的,最好带着彩色预染MARKER一起跑,要超高分子量的。