能跟下游的纯化工艺有关,如果先浓缩再层析就会有问题,因为浓缩的过程中DNA会缠绕结合在病毒表面。所以如果能改工艺的话,可以将收获液澄清后直接上离子交换层析,再进行后续纯化,DNA残留应该就能达标了。 |
加酶处理是一个解决方法,但能否受到国家认可也是未知。关键点应该还是在上游培养,减少DNA的释放,还有旁友提到了浓缩,这个确实是个问题,像成大的毒株其免疫原性比较好,根本不用做大倍数的浓缩,其下游纯化的压力就比较少,采取柱层析的方法即可。 |
加DNA酶是一种方法,可到现在SFDA都没承认,存在法规上的风险,最好还是在上游对DNA进行控制,在细胞凋谢前进行收获也好,提高病毒的产率减小浓缩倍数也好,都是很好的方法,但在实际生产中要进行摸索和研究。下游也可以采取一些措施,如采用离子交换层析等方法。总之,一要控制好DNA产生的源头,使其最小化,二是提高病毒的收率,三是采取有效的去除DNA的方法。也许做好以上一点就可以使产品的DNA达标,也许需要同时做好几点才能使产品的DNA达标,这就要看在实际生产中的操作控制了。 |
提问时间: | 2024-12-31 |
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