煮蛋白,忘计时了,结果活生生煮了一个半小时左右,肠子都悔青了。。。
问前辈高手,这样的蛋白跟煮10分钟有什么区别呢,在量上会有降解而少掉吗??
最好还是丢弃吧,没有这样的经验,可能会有影响。蛋白质的降解是需要蛋白酶的活性,而煮沸后蛋白都变性了,没有活性。
理论上开水浴时间达到10min就可使蛋白变性,煮的时间长一点应该没问题;有样品的话,最好重新做一份样品,这两个条件的样品做一下SDS-PAGE课有何不同;
我以前用来做SDS-PAGE的样品煮过30min,结果和10min的没有区别
我觉得应该没什么不一样吧...煮蛋白就是为了让他变性...10min就可以达到目的了...30min影响应该不会很大吧...