2025-01-14 12:22:49

用于WB所提取的蛋白质失误100度变性了一个半小时,会有什么后果?

煮蛋白,忘计时了,结果活生生煮了一个半小时左右,肠子都悔青了。。。

问前辈高手,这样的蛋白跟煮10分钟有什么区别呢,在量上会有降解而少掉吗??

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3个回答

最好还是丢弃吧,没有这样的经验,可能会有影响。蛋白质的降解是需要蛋白酶的活性,而煮沸后蛋白都变性了,没有活性。

2025-01-14 16:00:42

理论上开水浴时间达到10min就可使蛋白变性,煮的时间长一点应该没问题;有样品的话,最好重新做一份样品,这两个条件的样品做一下SDS-PAGE课有何不同;

我以前用来做SDS-PAGE的样品煮过30min,结果和10min的没有区别

2025-01-14 16:16:29

我觉得应该没什么不一样吧...煮蛋白就是为了让他变性...10min就可以达到目的了...30min影响应该不会很大吧...

2025-01-15 07:53:05

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