现在正在用Western blot检测海马炎症因子表达,一直没有结果,内参条带很好,就是目的蛋白是白板,一抗用的是Abcam的,换了另一公司的抗体,也还是一样!有做过这方面的,帮忙解答下,谢谢
一般不能用WB检测
一般来讲,分泌蛋白也可以用WB检测。可能原因: 1,蛋白浓度太低。 2,抗体不行。解决办法: 1,加大上样量或者重新提浓度更高的蛋白。 2,无图无法帮你鉴定。
这个属于分泌蛋白,感觉最好是用ELISA检测血循环中的因子含量比较好
感觉做ELASA应该很好出结果,跑WB的话,是不是样品浓度太低了。你这个抗体牌子还不错啊,你看下换个牌子的抗体试试,是不是抗体批次保存什么的出问题了?
最好用15%gel, 膜孔径越小越好。
用WB可以做出IL-1β,没有问题,湿转200mA,75分钟,15%的胶,个人感觉WB比ELISA更有说服力。