最常用的固相载体（膜）主要是硝酸纤维素（NC）膜和聚偏二氟乙烯（PVDF）膜。硝酸纤维素（NC）膜与蛋白质之间靠疏水作用结合，无需预先活化，对蛋白质的活性影响小；非特异性本底显色浅；价格低廉，使用方便。但结合在NC 上的小分子蛋白质在洗涤时易丢失；NC韧性较差，易损坏。聚偏二氟乙烯(PVDF)膜与蛋白质亲和力高，用前需在甲醇中浸泡，以活化膜上的正电基团，使其更容易与带负电荷蛋白结合。根据被转移的蛋白分子量大小，选择不同孔径的NC膜。因为随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。通常用0.45 μm 和0.2 μm 两种规格的NC 膜。大于20 KD 的蛋白可用0.45 μm 的膜，小于20 KD 的蛋白就要用0.2 μm 的膜。PVDF膜灵敏度、分辨率和蛋白亲和力比常规的膜要高，非常适合于低分子量蛋白的检测。

除了处理方法不一样外，ＰＶＤＦ膜和ＮＣ膜的还有两点不一样：ＰＶＤＦ膜拦截率比ＮＣ膜要高一些，也就是说如果转膜时间过长，ＰＶＤＦ膜上所剩余的蛋白要多一些；其次，如果用荧光法做ＷＢ，那么建议不要用ＰＶＤＦ膜，这样背景会很高；个人感觉ＥＣＬ显色用ＮＣ膜背景也好控制一些，但是如果用ＤＡＢ显色，那么我认为还是首推ＰＶＤＦ膜。

两者各有优劣，PVDF膜的主要缺点是使用前需要使用有毒的甲醇浸泡，普通NC膜的主要缺点是膜比较脆，在处理的时候容易破裂。但是在其他方面如载量，与蛋白的亲和性等关键指标在处理正常的蛋白浓度范围内，差别并不明显。选择PVDF膜的品牌首推Millipore，但Pall等其他膜性价比也很高；NC膜首推WHATMAN的SS膜，当然pall，amersham等牌子的产品也不错。

用法也不一样的，PVDF膜用甲醇润湿15s，NC膜用ddH2O自然浸透

这个问题问过我的老师，他说PVDF膜需要泡甲醇进行活化 而NC膜不用，用甲醇泡过NC膜 结果是 NC膜皱缩，卷曲，顿时心就凉了