2025-01-22 09:10:39

透析脱盐时为什么总有絮状沉淀?

请教各位高手:蛋白质脱盐我用的是透析的方法,透析溶液用的是双蒸水,每两个小时换一次,透析两到三天,盐还是透析不干净,我怀疑是透析袋老化的问题(还是四年前订的),于是又订了一批新的透析袋,才透析一天,就发现里面有絮状沉淀物出现,请问这是什么原因?这样纯化出来的蛋白质对制备抗体会不会有影响?


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6个回答

烈建议你透析的时候要用缓冲液,ph值是保持此种蛋白质稳定性的最佳值,要不然就很有可能因为ph值的变化而沉淀。这是我的一点经验。



2025-01-22 10:07:21

制备抗体用的蛋白可以保存在PBS里的,你可以用PBS透析(4度,透析2小时,然后换新的PBS,再透析3小时或者过夜都行)。或者直接去过脱盐柱(有买的)


2025-01-22 11:54:02

透析经常出现沉淀是很正常的,因为离子强度改变很容易因起蛋白沉淀,最好是对缓冲液透析,不用双蒸水,这样可以减少沉淀



2025-01-23 04:11:30

透析用的缓冲液的浓度一般都比较小,有时候只要几个mmol/L就可以,所以一般不用除去。



2025-01-23 04:26:06

打免疫时缓冲液不影响,强烈建议用PBS透析.


2025-01-23 04:35:54

建议低温下透析,保持一定的缓冲液成分,对蛋白稳定性有帮助。


2025-01-23 04:40:08

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